水产蛋白源生物活性肽研究进展(4)
2.5 矿物质结合活性肽
矿物质是构成人体组织和维持正常生理功能所必需的7大营养素之一,膳食矿物质的缺乏会导致许多疾病。矿物质结合活性肽是指具有结合矿物质离子活性的肽类物质,其与矿物质离子结合后,可促进或增强矿物质离子在肠道中的生物利用度。从南极磷虾[23]、太平洋鳕鱼骨[41]的酶解产物中可分别纯化鉴定出钙离子结合活性肽Val-Leu-Gly-Tyr-Ile-Gln-Ile-Arg(相对分子质量为960.58)、Lys-Gly-Asp-Pro-Gly-Leu-Ser-Pro-Gly-Lys(相对分子质量为954.5)。从牡蛎[24]、阿拉斯加鳕鱼皮[22]蛋白水解物中可分别纯化鉴定出锌离子结合活性肽His-Leu-Arg-Gln-Glu-Glu-Lys-Glu-Glu-Val-Thr-Val-Gly- Ser-Leu-Lys(相对分子质量为1882.0)、Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-His-Gly-Pro-Pro-Gly(相对分子质量为842)。从阿拉斯加鳕鱼皮[30]、鳀鱼肌肉[25]蛋白水解物中可分别纯化鉴定出铁离子结合活性肽Ser-Cys-His(相对分子质量为305)、Glu-Leu-Glu-Gly-Glu-Val-Asp-Ala-Glu-Gln-Lys(相对分子质量为7593.90)、Glu-Gln-Asp-Thr-Ser-Ala- His-Leu-Glu-Arg-Met-Lys(相对分子质量为8105.95)。
Caco-2细胞试验表明,从阿拉斯加鳕鱼皮[42]、鳀[43]、海参Stichopusjaponicus卵子[44]等水产蛋白中制备分离的矿物质结合活性肽在Caco-2细胞模型中均显示出可增加钙、锌、铁等矿物离子的摄取,促进矿物质离子的转运,进而提高矿物质离子的吸收率。此外,动物试验表明,从罗非鱼鳞片蛋白[45]中制备的钙离子结合活性肽可显著增加大鼠幼崽股骨中骨矿物质的密度、股骨钙含量及血清钙值,增强小肠对钙的吸收。鸭蛋蛋白肽-Fe2+结合物(DPs-Fe2+)[46]及三肽铁(Arg-Glu-Glu-Fe2+)[47]均可使缺铁性贫血大鼠的体质量、器官系数和血液学参数恢复到正常水平(P<0.05),并调节细胞顶膜的Fe2+转运蛋白(divalent metal transporter 1,DMT1)、细胞基底膜的铁蛋白转运蛋白(ferroportin 1,FPN1)及铁离子调节蛋白(Hepcidin)表达,这表明DPs-Fe2+和Arg-Glu-Glu-Fe2+均可作为潜在的Fe2+补充剂。鳕骨骼蛋白肽-Fe2+结合物[48]可使缺铁性贫血大鼠的体质量、身高和血液参数恢复到正常水平,与FeSO4相比,鳕骨骼蛋白肽-Fe2+结合物显著增加了缺铁性贫血大鼠体质量,并有效改善血红蛋白、血清铁离子和转铁蛋白水平,还可恢复铁离子与转铁蛋白的结合能力。
续表1 水产蛋白源生物活性肽 Bioactive peptides derived from fishery proteins食物源food source酶enzyme酶解条件enzymolysis conditions纯化鉴定purification and identification序列sequence活性activity参考文献reference雪蟹Chionoecetes opilioProtamex料液比1∶2(w/v)、E/S =1∶1(v/w)、40 ℃、1 h纯化:固相萃取(SPE)鉴定:RP-HPLC联合LC-MS/MSPhe-Ala-Pro-Thr-Gly-Pro-Thr-Thr-Glu-Val-Lys-Ser、Ala-Ala-Ile-Glu-Glu-Gly-Ile-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Val-Ala-Leu抗菌El等[12]大西洋鲑明胶Salmo salargelatin胃蛋白酶、Corolase PP料液比2%(w/v)、胃蛋白酶(E/S=1%(w/w)、pH 2.0、37 ℃、1.5 h)、Coro-lase PP(E/S=2.5%(w/w)、pH 7.5、37 ℃、2.5 h)纯化:RP-HPLC鉴定:UPLC-ESI-MS/MSGly-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Ala-Val、Gly-Pro-Val-Ala、Pro-Pro、Gly-Phe降血压Neves等[13]大马哈鱼皮 Oncorhynchus keta skin胰蛋白酶E/S=1∶100(w/w)、37 ℃、pH 7.0、12 h纯化:GFC、RP-HPLC鉴定:Q-TOF LC-MS/MSGly-Leu-Pro-Leu-Asn-Leu-Pro降血压Lee等[14]牙鲆肌肉Paralichthys olivaceus muscle胃蛋白酶料液比1∶20(w/v)、E/S=1∶100(w/w)、50 ℃、pH 2.0、18 h纯化:UF、GFC、RP-HPLC鉴定:Q-TOF ESI-MS/MSMet-Glu-Val-Phe-Val-Pro、Val-Ser-Gln-Leu-Thr-Arg降血压Ko等[15]菲律宾蛤仔Ruditapes philippinarumα-胰凝乳蛋白酶料液比2%(w/v)、40 mg酶、pH 7.0、37 ℃、8 h纯化:UF、IEC、RP-HPLC鉴定: Milligen 6600蛋白质测序仪Ala-Val-Leu-Val-Asp-Lys-Gln-Cys-Pro-Asp抗癌、抗肿瘤Kim等[16]牡蛎Saccostrea cucullata蜡状芽孢杆菌SU12产生的蛋白酶E/S=1%(w/w)、40 ℃、pH 7.0、4 h纯化:GFC、UPLC鉴定:Q-TOF LC-MS/MSLeu-Ala-Asn-Ala-Lys抗肿瘤Umayaparvathi等[17]钝顶螺旋藻Spirulina platensis胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶料液比3%、胃蛋白酶(E/S=6%(w/w)、37 ℃、pH 2.0、2 h)、胰蛋白酶(E/S=3%、37 ℃、pH 8.0、3 h)、胰凝乳蛋白酶(E/S=5%、37 ℃、pH 8.0、3 h)纯化:UF、GFC鉴定:MALDI-TOF-MS/MSHis-Val-Leu-Ser-Arg-Ala-Pro-Arg抗癌Wang等[18]阿拉斯加鳕鱼骨Eleginus gracilis bone胰蛋白酶料液比25 g/L、E/S=24 U/mg、50 ℃、pH 8、290 min纯化:IEC、GFC、RP-HPLC鉴定:Q-TOF-ESI-MS/MSAsn-Gly-Met-Thr-Tyr、Asn-Gly-Leu-Ala-Pro、Trp-Thr、Pro-Thr-Gly-Ala-Asp-Tyr免疫调节Hou等[19,39]波纹巴非蛤Paphia undulata碱性蛋白酶料液比1∶3(w/v)、E/S=4.321 U/g、51 ℃、3.14 h纯化:UF、GFC、RP-HPLC鉴定:ESI-MS/MSPro-His-Thr-Cys、Val-Gly-Try-Thr、Glu-Phe、Leu-Phe、Glu-Gly-Ala-Lys、Trp-Ile、Trp-Leu免疫调节He等[20]贻贝Mytilus coruscus风味酶料液比1∶50(w/v)、E/S=1∶50(w/w)、52 ℃、pH 7.0、1.5 h纯化:UF、IEC、GFC、RP-HPLC鉴定:Milligen 6600蛋白质测序仪Gly-Val-Ser-Leu-Leu-Gln-Gln-Phe-Phe-Leu免疫调节Kim等[21]阿拉斯加鳕鱼皮Eleginus gracilisskin胰蛋白酶E/S=0.6% (w/w)、pH 8.0、37 ℃、6 h纯化:IMAC、GFC-FPLC、RP-HPLC鉴定:LC-ESI-MS/MSGly-Pro-Ala-Gly-Pro-His-Gly-Pro-Pro-Gly结合钙、锌、铁Cuo等[22]太平洋鳕鱼骨Gadus macrocephacusbone胰蛋白酶、中性蛋白酶料液比1∶40(w/v)、胰蛋白酶∶中性蛋白=1∶1、E/S=1∶100(w/w)、50 ℃、pH 7.2、8 h纯化:羟基磷灰石色谱(HAC)、RP-HPLC鉴定:LC-ESI-MS/MSLys-Gly-Asp-Pro-Gly-Leu-Ser-Pro-Gly-Lys结合钙Zhang等[41]南极磷虾Euphausia superba胰蛋白酶料液比1∶2(w/v)、E/S=2%(w/w)、50 ℃、pH 8、4 h纯化:羟基磷灰石色谱(HAC)、SEC、RP-HPLC鉴定:LTQ Orbitrap XLVal-Leu-Gly-Tyr-Ile-Gln-Ile-Arg结合钙Hou等[23]牡蛎Saccostrea cucullata胃蛋白酶料液比1∶3(w/v)、E/S=1.5∶100(w/w)、40 ℃、pH 1.5、5 h纯化:IMAC-Zn2+、RP-HPLC鉴定:LC/LTQHis-Leu-Arg-Gln-Glu-Glu-Lys-Glu-Glu-Val-Thr-Val-Gly-Ser-Leu-Lys结合锌Chen等[24]阿拉斯加鳕鱼皮Eleginus gracilisskin胰蛋白酶E/S=0.6% (w/w)、pH 8.0、37 ℃、6 h纯化:IMAC-Fe2+、GFC-FPLC、RP-HPLC鉴定:LC-ESI-MS/MSSer-Cys-His结合铁Guo等[30]太平洋鳕鱼皮Gadus macrocephacus skin胰蛋白酶E/S=4% (w/w)、pH 7.5、37 ℃、4 h纯化:IMAC-Fe2+、RP-HPLC鉴定:UPLC -LC-ESI-MS/MSGly-Pro-Ala-Gly-Pro-His-Gly-Pro-Pro-Gly-Lys-Asp-Gly-Arg、Ala-Gly-Pro-His-Gly-Pro-Pro-Gly-Lys-Asp-Gly-Arg、Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Ala-Arg结合铁Wu等[50]鳀鱼肌肉Engraulis japonicus muscle胰蛋白酶E/S=4∶100(w/w)、37 ℃、pH 8.0、4 h纯化:SEC、IMAC-Fe3+、RP-HPLC鉴定:MALDI TOF/TOFGlu-Leu-Glu-Gly-Glu-Val-Asp-Ala-Glu-Gln-Lys、Glu-Gln-Asp-Thr-Ser-Ala-His-Leu-Glu-Arg-Met-Lys结合铁Wu等[25]
文章来源:《水产科技情报》 网址: http://www.sckjqbzz.cn/qikandaodu/2021/0502/486.html
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